儿童特发性血小板减少性紫癜与人类巨细胞病毒感染

大三哥

儿童特发性血小板减少性紫癜与人类巨细胞病毒感染
【关键词】  细胞病毒

    人类巨细胞病毒(HCMV)属疱疹病毒科，侵入机体后具有潜伏－活动性。潜伏感染在一定条件下能被激活，导致活性感染和病毒向其他组织的播散。其在人群中有较高的感染率，可以引起全身多器官、多组织的感染，尤其在免疫功能损害、器官移植和某些特殊年龄(如老年、婴幼儿)个体及孕妇，可以引起致死或致残性多重感染。特发性血小板减少性紫癜(ITP)是儿童出血性疾病之一，有些HCMV感染的患儿临床惟一症状就是血小板减少性紫癜。关于ITP发病机制目前公认为病毒感染是引发其免疫机制及直接作用于骨髓破坏巨细胞的重要原因之一［1］。近几年的临床实践中，我们发现某些ITP患儿血清CMV?IgM阳性及尿HCMV?DNA阳性，且经更昔洛韦静脉滴注联合其他免疫治疗取得很好疗效，从而引发我们去探讨ITP与HCMV病毒感染之间的关系，以及对ITP治疗的指导作用。

    1  资料与方法

    1.1  一般资料

    ITP组36 例，均为我院血液科住院经临床及血液学实验检查确诊的患者，符合1986年首届中华血液学会全国止栓与止血学术会议有关凝血疾病的诊断标准。年龄3个月～12 岁，男23 例，女13 例。对照组为我院儿童保健门诊正常体检儿童共28 例，年龄6个月～12 岁，男19 例，女9 例。

    1.2  方法

    取以上儿童的非抗凝血清。用酶联免疫捕抓法(ELISA)检测血清中CMV?IgM。试剂由深圳市科润达生物工程有限公司提供，取1∶100稀释血清100 mL加入相应反应孔中，分别加入100 μL阳性、阴性及临界值对照，37℃放置1 h，洗板加酶标物、底物等过程，用PR?521全自动酶标仪450 mm波长测定OD值。判断结果：样本孔OD值＞临界值对照OD值为阳性，样本孔OD值＜临界孔对照OD值为阴性。

    取以上儿童晨尿中段尿留置无菌干澡瓶，取1 mL尿液置1.5 mL离心管中；离心10 min弃上清液，沉淀加无菌生理盐水1 mL打匀再离心5 min，沉淀直接加50 μLDNA提取液充分混匀，再离心5 min，取上清液2 μL做PCR反应，试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。扩增后PCR反应管放入DA?620荧光检测仪并记录读数，计算定量。结果判定：CMV－DNA含量(基因)＝50×10n或25×10n，n值＞0为阳性。

    2  结    果

    经CMV?IgM，ELISA检测，在36 例ITP患者中CMV?IgM阳性率为22.2％，而在正常体检儿童对照组中CMV?IgM阳性率为0(见表1)。

    使用中山医科大学达安基因诊断中心提供的HCMV?DNAPCR法试剂盒检测尿液标本，定量测定CMV?DNA含量25×10n或50×10n，n大于0为阳性。ITP组阳性率为47.2％，对照组阳性率为14.3％，χ2检验P＜0.01(见表2)。表1  两组血清CMV?IgM检测结果 表2  两组尿HCMV?DNAPCR检测结果

    3  讨    论

    目前ITP已被认为是一种常见的以抗血小板抗体介导的以血小板减少为特征的自身免疫性疾病。其病因目前尚未完全阐明。近年来，随着免疫学及分子微生物学的迅速发展，ITP的病因研究取得很大进展，认为其急性期多与病毒感染有关，现已证明与ITP有关的病毒有10多种［1］，特别是HCMV感染与ITP关系尤为密切。从本文对36 例ITP患儿进行血CMV?IgM及尿液HCMV?DNA检测结果来看，ITP组HCMV活动性感染明显高于对照组(以CMV?DNAPCR阳性及CMV?IgM阳性作为活性感染指标)，P＜0.01，差异有显著性，进一步证实ITP与CMV病毒感染密切相关。且从两组结果分析HCMV?DNAPCR阳性率高于CMV?IgM阳性率，由于PCR检测敏感性高，特异性差，不能区分潜伏性感染和活动性感染。此外，由于IgM产生的量不仅与病毒负荷有关，还与患者免疫功能有关，婴幼儿免疫功能不完善，在感染HCMV后可能不出现抗体反应［2］，而会出现CMV?IgM假阴性。

    儿童急性ITP多与前期病毒感染有关。血小板表面糖蛋白与病毒病原微生物间存在相同或相似的抗原决定簇，感染时机体产生抗病毒抗体可与血小板膜抗原发生交叉反应，产生血小板自身抗体，其与血小板结合后导致单核－巨噬细胞系统(主要是脾脏)对血小板吞噬、破坏增加，血小板寿命缩短。此外自身抗体也影响巨核细胞，导致巨核细胞生成血小板的功能受到 损害。或者抗病毒抗体与相应抗原形成免疫复合物附着于血小板表面导致血小板破坏增加［3］。此为病毒感染所引发ITP的免疫机制之一。另一机制为病毒直接作用于骨髓原始细胞，抑制破坏巨核细胞引起出血、紫癜等ITP表现。在ITP患者巨核细胞及单核细胞中，杨文博［4］报道检出巨细胞病毒、包涵体以及见到细胞结构改变。CRAPNELL［5］均通过体外用HCMV感染正常人类骨髓，然后加入重组GM?CSF(粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子)和G?CSF(粒细胞集落刺激因子)作用后发现CMV可抑制巨核细胞的体外集落形成而致血小板减少，也支持病毒本身的直接作用。因此病毒感染，尤其CMV感染是引起ITP很重要的原因之一。临床实验也充分证明了这一点。临床上发现一部分ITP患者经常规激素加IVIG及其他免疫抑制剂治疗后临床症状、体征及血液学实验室指标恢复很慢且有反复，根据CMV的临床感染指标检测，在加用抗病毒药物(更昔洛韦)后患者的临床症状及血小板计数有明显改善。更昔洛韦是继阿昔洛韦后所开发的广谱抗病毒药物，抑制疱疹病毒科病毒的的复制，对缺乏腺苷激酶的耐药菌株及巨细胞病毒的作用更显著。临床实践证明更昔洛韦对HCMV活动性感染的ITP有很好的疗效。

    综上所述，HCMV是导致ITP病因中最重要的病毒之一，也是抑制患者细胞免疫功能引起ITP患者容易反复发作的重要原因之一。因此，在临床工作中对难治性ITP患者的实验室检测，不仅需要血液学检测，而且需要病毒学实验室检测，尤其是CMV检测，且可以指导我们在治疗中除常规免疫治疗外使用更昔洛韦可能会很好地提高疗效。

孟桐妃

好贴！！！
其实俺们成人也有这个问题。

fortunatewang

儿子检查,巨细胞病毒》250 但是阴性的，医生用过更昔洛韦，但效果不大。

fortunatewang

儿子检查,巨细胞病毒》250 但是阴性的，医生用过更昔洛韦，但效果不大。

长卿妈妈

医生也讲，儿童95%都是由于病毒感染引起，问题是抗病毒无特效药，像阿昔洛韦这些虽说是抗病毒的药，但疗效都很一般

大三哥

我家刚查完这4项也没问题~~~~~

祺祺妈妈

祺祺第二次住院也查了巨细胞,没问题.

yanlin0024

祺祺妈妈 发表于 2011-9-25 13:51

                               
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祺祺第二次住院也查了巨细胞,没问题.

祺妈，近来可好？看到你一家的照片可真好！

祺祺妈妈

yanlin0024 发表于 2011-9-25 20:10

                               
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祺妈，近来可好？看到你一家的照片可真好！

请问，您是？

yanlin0024

我是丽水的，还记得不，我有一个十七岁大的女儿。

祺祺妈妈

嫣姐,我知道是你了.

祺祺妈妈

yanlin0024 发表于 2011-9-30 21:38

                               
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我是丽水的，还记得不，我有一个十七岁大的女儿。

嫣姐,我知道是你了.

风中百合

很专业

franceshu

桐妃 发表于 2011-9-21 23:31

                               
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好贴！！！
其实俺们成人也有这个问题。

一些中药可以抗病毒的。不过听说病毒一旦进入体内，是没有办法根本消灭干净，只能抑制住。如果自己不注意，劳累了，免疫低了，病毒可能又出来作怪了。所以，我觉得这是我们成人慢性ITP复发的原因吧。

崽崽—江西妈妈

我小孩检查,尿查巨细胞病毒（HCMV）1.6E-05 ，阳性的，医生用过更昔洛韦，但效果不大。 后来复发了，尿查巨细胞病毒（HCMV）更高，就没再打更昔洛韦了。

小手手

我家住院查巨细胞病毒是有抗体，是不是代表孩子曾经感染过。得了itp是不是和这个有关？和我们一起住院的那个ITP宝宝就是巨细胞感染。

咱当爹滴人

三哥辛苦了，狠受用

zhongli

鷳лл